10
№3 (45) •2015
ГЕНЕТИКА
с изменением связывания
XPD
с
cdk
-активирующей ки-
назой и р44 субъединицей транскрипционного фактора
(TF)
IIH
, что приводит к ослаблению функциональной
активности последнего.
CDK7
субъединица данного
транскрипционного фактора фосфорилирует ядерные
рецепторы, чтоприводитклиганд-зависимомуконтролю
активации генов гормонального ответа, необходимому
для нормального развития плаценты. При наличиимута-
ций в гене
XPD
происходит нарушение белок-белковых
взаимодействий с
TFIIH
и его мишенями, необходимых
дляфункционирования плаценты [8, 10].
Целью настоящей работы
являлось изучение ча-
стот полиморфных вариантов генов системы репарации
ДНК, в том числе полиморфизма
Asp148Glu
гена
APEX1
(MIM*107748),
Lys751Gln
гена
ERCC2 (XPD)
(MIM*126340)
и
del1100C
гена
СНЕК2
(MIM+604373) уженщин сфизио-
логическим и патологическим течением ранних сроков
беременности.
МАТЕРИАЛИМЕТОДЫИССЛЕДОВАНИЯ
Материалом для исследования полиморфизмов генов
системы репарации и контроля клеточного цикла послу-
жили образцы ДНК, полученные из лейкоцитов перифе-
рической крови беременных женщин, а также из хори-
онической ткани, полученной при медицинском аборте
или при спонтанном аборте раннего срока. В контроль-
ную группу были включеныженщины с физиологически
протекавшей беременностью, решившие ее прервать
на сроке 6—12 недель (24 образца хориона и 32 образ-
ца крови). Группу сравнения составилиженщины с пато-
логическим течением беременности: неразвивающаяся
беременность (18 образцов хориона и 22 образца крови)
илиспонтанныйаборт (14образцовхорионаи23образца
крови). У женщин, включенных в исследуемые группы,
были исключены анатомические и гормональные анома-
лии. Все женщины подписали информированное согла-
сие об участиив исследовании.
Выделение ДНК из лейкоцитов крови проводили тер-
мокоагуляционным методом (ДНК-экспресс-кровь, Ли-
тех). Для выделения ДНК из тканей использовали фе-
нол-хлороформный метод. Полиморфизмы генов
APEX1
,
ERCC2 (XPD)
и
СНЕК2
анализировали с использованием
набора реагентов
SNP
-экспресс (Литех, Москва).
Разделение продуктов амплификации проводили ме-
тодом горизонтального электрофореза в 3% агарозном
геле. Анализ электрофореграмм проводили на трансил-
люминатореGelDoc (BioRad).
Статистический анализ полученных данных прово-
дили с помощью программного пакета MS Excel. Соот-
ветствие распределения частот генотипов равновесию
Харди — Вайнберга определяли по стандартным фор-
мулам. Для всех исследуемых аллелей выявлено соот-
ветствие равновесию Харди — Вайнберга. Оценку раз-
личий в распределении полиморфных вариантов генов
в обследованных группах осуществляли по критерию
c
2
при помощи программы BIOSTAT. Расчет OR проводили
с помощьюпрограммыGraphPadInStat3.
РЕЗУЛЬТАТЫИССЛЕДОВАНИЯИИХ
ОБСУЖДЕНИЕ
НиводномизисследуемыхобразцовДНК,полученных
из лейкоцитов периферической кровиженщин, не выяв-
леноделециипо гену
CHEK2.
Анализ частот генотипов в образцах крови по по-
лиморфизму
Asp148Glu
гена
APEХ1
показал, что как
в контрольной группе, так и в группе с невынашиванием
беременности преобладают гетерозиготные носители
данного полиморфизма (табл. 1). Около трети женщин
в контрольной группе и в группе со спонтанным абортом
являются гомозиготамипополиморфному варианту гена
апуриновой/апиримидиновой эндонуклеазы.
Подобный характер распределения частот генотипов
и аллелей выявлен и для полиморфизма
Lys751Gln
гена
ERCC2
(табл. 1). Статистически значимых различийв ча-
стотах генотиповиаллелейпополиморфизмамисследу-
емых двух генов между контрольной группой и группами
женщин со спонтанным абортом или неразвивающейся
беременностьювыявленоне было.
Анализ частот генотипов в образцах хориона по поли-
морфизмам
Asp148Glu
и
Lys751Gln
генов
APEX1
и
ERCC2
,
Таблица 1
Частота генотипов (%) и аллелей геновAPEХ1 иXPD в образцах крови беременныхженщин
Ген, полиморфизм
Контроль (МА)
Патологиябеременности
СА, абс.(%)
c
2
1
(Р)
НБ, абс. (%)
c
2
1
(Р)
APEX1Asp148Glu
Asp/Asp
7 (21,9%)
5 (21,7%)
0,09 (0,96)
5 (22,7%)
0,5 (0,78)
Asp/Glu
15 (46,85%)
10 (43,5%)
12 (54,5%)
Glu/Glu
10 (31,25%)
8 (34,8%)
5 (22,7%)
Частота аллели
148Glu
0,55
0,57
0,5
c
2
2
(Р)
0,04 (0,85)
0,23 (0,63)
ERCC2 (XPD) Lys751Gln
Lys/Lys
4 (12,5%)
5 (21,7%)
1,2 (0,55)
6 (27,3%)
2,08 (0,35)
Lys/Gln
21 (59,4%)
12 (52,2%)
11 (50%)
Gln/Gln
7 (28,1%)
6 (26,1%)
5 (22,7%)
Частота аллели
751Gln
0,55
0,52
0,48
c
2
2
(Р)
0,07 (0,79)
0,51 (0,48)
Примечание: МА –медицинский аборт; СА – спонтанный аборт; НБ – неразвивающаяся беременность;
c
2
1
– сравнение частот генотипов с контролем;
c
2
2
– сравнение частот аллелей с контролем.
